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Vero細胞無血清培養(yǎng)基在流感疫苗中的應用

更新時間:2019-03-04  |  點擊率:1749

流行性感冒(Influenza)簡稱流感,是由流感病毒(Influenza Virus)引起的急性呼吸道疾病,流感病毒具有高度的傳染性和較強的變異性,每年在各個國家呈季節(jié)性流行和地區(qū)性爆發(fā),甚至世界范圍內(nèi)流行。

面對流感侵襲,人們主要通過勤洗手、帶口罩或開展公眾教育等措施進行預防,但這些措施并不十分有效。為有避免流感的侵襲,20世紀40年代,人們通過雞胚擴增得到的流感疫苗株,用于人類的流感預防*。目前,正在使用或正在研發(fā)的針對流感的疫苗包括全病毒疫苗、裂解疫苗、亞單位疫苗及冷適應減毒活疫苗仍是使用雞胚為培養(yǎng)基質(zhì)生產(chǎn)的,然而大流感發(fā)生時不斷増長的疫苗和疫情防控需求使雞胚生產(chǎn)平臺中雞胚供應不足、卵清蛋白過敏及產(chǎn)量有限等諸多缺陷越來越明顯。

迫切需要找到一種能快速生產(chǎn)安全有效的流感疫苗的介質(zhì),世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦利用哺乳動物細施培養(yǎng)技術替代雞胚培養(yǎng)技術生產(chǎn)流感疫苗。利用細胞培養(yǎng)生產(chǎn)流感疫苗具有顯著的優(yōu)點:①細胞培養(yǎng)系統(tǒng)操作簡單,可實現(xiàn)大規(guī)模培養(yǎng);②細胞培養(yǎng)系統(tǒng)中繁殖的病毒與原流感病毒分離株的匹配度更高;③雞胚生產(chǎn)的流感疫苗可能引發(fā)人體過敏反應,而通過細胞培養(yǎng)制備的疫苗可克服此缺點。

目前可用于流感疫苗生產(chǎn)的細胞系主要有狗腎腫瘤細胞系(MDCK)、非洲綠猴腎細胞系(Vero)、人視網(wǎng)膜細胞系(PER.C6)等。其中Vero細胞系是世界衛(wèi)生組織(WHO)和我國生物制品規(guī)程推薦的人用疫苗生產(chǎn)細胞系,已成功應用于包括流感疫苗在內(nèi)的多種疫苗的生產(chǎn),其安全性已得到充分認證。

在疫苗生產(chǎn)過程中,為了獲得高滴度、高質(zhì)量的病毒液,需要高密度的細胞提供病毒復制的基質(zhì),為實現(xiàn)細胞的高密度培養(yǎng),在體外培養(yǎng)細胞時會添加一定量的血清,血清可提供細胞生長所需的必需營養(yǎng)物質(zhì),如貼壁生長因子、激素、微量元素、載體蛋白等。

使用血清也會有很多的不足:①血清容易引起細菌、真菌、病毒及支原體的污染,會增加疫苗生產(chǎn)的安全性隱患;②血清的質(zhì)量在批次間存在很大的差異,影響疫苗生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和疫苗質(zhì)量控制;③血清成分復雜,含有多種蛋白質(zhì)、激素、生長因子等,増加疫苗等產(chǎn)品連續(xù)純化過程的難度;④血清價格昂貴,在產(chǎn)品規(guī)?;a(chǎn)時會増加放大成本;⑤血清中含有能促進細胞生長的物質(zhì),但也含有一些對細胞有毒性作用和抑制作用的物質(zhì),影響細胞的生長,血清使用造成的細胞培養(yǎng)過程和疫苗生產(chǎn)的安全性問題及生產(chǎn)成本増加的問題,成為動物細胞無血清培養(yǎng)技術研究和應用的發(fā)展動因,因此,基于細胞和產(chǎn)品特性的無血清培養(yǎng)基研制己成為細胞工程領域的重要課題。

例如:HiMedia公司生產(chǎn)的基礎培養(yǎng)基SFRE系列,是基礎培養(yǎng)基M199的改良款,該系列分為SFRE199-1和SFRE199-2,可用于培養(yǎng)Vero細胞。與M199相比主要區(qū)別是提高了葡萄糖和氨基酸的濃度,降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度。另外加入硫酸鋅、丙酮酸鈉和魚精蛋白鋅胰島素。

 

SFRE 199-1有Hank's鹽;SFRE 199-2含有Earle's鹽,兩款均不含胰島素,需要使用前自行添加??蔁o血清培養(yǎng),與加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基比較,細胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同,均在移植后第6天單層細胞達到充分融合。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商,在細胞培養(yǎng)、微生物培養(yǎng)和檢測領域,一如既往地為您帶來的服務。

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